Серологический метод

Серологический метод исследования основан на определенных свойствах сыворотки крови зараженного грибковой инфекцией человека.

При поражении организма грибковой инфекцией в сыворотке крови в ответ на заражение формируется иммунный ответ, который начинает уничтожать клетки возбудителя инфекции. Принято называть инфекционный агент – антиген, а клетки, которые вырабатываются организмом – антитела. В сыворотке крови у инфицированного человека формируются комплексы ангиген-антитело, которые и удается фиксировать при исследовании. И по количественным и качественным результатам оценить заболевания и его фазу (острый или хронический процесс). На каждый вид грибковой инфекции формируется отдельные антитела.

Все серологические реакции делятся на:

  • двухкомпонентные: агглютинация, пассивная гемагглютинация, преципитация, реакция связывания комплемента;
  • трехкомпонентные или косвенные: реакция нейтрализации, реакция торможения гемагглютинации;
  • реакции с использованием меченых (окрашенных) антител или антигенов.

Реакция агглютинации (РА) – основана на склеивании антигенов (патологических частиц) при помощи антител.

  • Реакция прямой гемагглютинации (РПГА) – к сыворотке крови больного добавляют взвесь мертвых возбудителей. Положительным ответом считается образования осадка в виде хлопьев.
  • Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) – основана на использовании эритроцитов (клеток крови) с находящимися на их поверхности антигенами, с соответствующими антителами сыворотка в пробирке дает легкий осадок.

Реакции преципитации – основана на выпадении в осадок при совпадении антигена и антитела к этому антигену. В пробирку с раствором антигена по стенке наливают сыворотку больного человека. При положительном результате в месте соприкосновения этих растворов формируется белое, непрозрачное кольцо преципитата.

Реакция нейтрализации – основанная на способности антител сыворотки крови нейтрализовать вредные последствия или действия токсинов грибковых клеток на организм инфицированного человека.

Реакция связывания комплемента (РСК) – если комплекс антиген-антитело образуется, что свидетельствует о положительной реакции, то взвесь в пробирке остается прозрачной. Если комплекс не образуется (отрицательная реакция), то в пробирке начинается разрушение эритроцитов и жидкость мутнеет.

Реакции на основе окраски антител и антигенов:

  • Реакция иммунофлюорисценции (РИФ) – основана на способности антигенов, окрашенных флюорохромом светится в ультрафиолетовых лучах под люминесцентным микроскопом.
  • Иммуноферментный анализ (ИФА) – сыворотку крови инфицированного больного метят различными ферментами (щелочной фосфатазой, пероксидазой хрена). Под люминесцентным микроскопом пероксидаза дает желто-коричневый цвет, фосфатаза – желто-зеленый.
  • Радиоимунный метод – окрашивание сыворотки крови мечеными радионуклидами.

Для выявления грибковой инфекции чаще всего используют такие серологические реакции, как:

  • ИФА (иммуноферментный анализ);
  • РИФ (реакция имунофлюорисценции);
  • РСК (реакция связывания комплемента);
  • РПГА (реакция прямой гемагглютинации);
  • РНГА (реакция непрямой гемагглютинации).